薄層色譜TLC是吸附色譜,展開過程中,組分在兩相之間發(fā)生多次吸附-解吸附平衡,吸附牢的組分隨展開劑移動(dòng)慢,吸附弱的組分隨展開劑移動(dòng)快,一段時(shí)間后,組分被分離,各組分在薄層板上形成不同距離的斑點(diǎn)。
薄層色譜TLC的實(shí)驗(yàn)步驟:
1)切割薄板。通常,買來的硅膠板都是方形的玻璃板,需用鉆石頭玻璃刀按照模板的形狀進(jìn)行切割。在切割玻璃之前,用尺子和鉛筆在薄板的硅膠面上輕輕地標(biāo)出基線的位置(注意不要損壞硅膠面)。借助鋒利的玻璃切割刀和一把引導(dǎo)尺,你便可方便地進(jìn)行玻璃切割。當(dāng)整塊玻璃被切割后,你就可以進(jìn)一步將其分成若干獨(dú)立的小塊了。(開始的時(shí)候,也許你會(huì)感到有一些難度,但經(jīng)過一些訓(xùn)練以后,你便會(huì)熟練地掌握該項(xiàng)技術(shù)。)
2)選取合適的溶劑體系?;衔镌诒“迳弦苿?dòng)距離的多少取決于所選取的溶劑不同。在戊烷和己烷等非極性溶劑中,大多數(shù)極性物質(zhì)不會(huì)移動(dòng),但是非極性化合物會(huì)在薄板上移動(dòng)一定距離。相反,極性溶劑通常會(huì)將非極性的化合物推到溶劑的前段而將極性化合物推離基線。一個(gè)好的溶劑體系應(yīng)該使混合物中所有的化合物都離開基線,但并不使所有化合物都到達(dá)溶劑前端,Rf值在0.15~0.85之間。雖然這個(gè)條件不一定都能滿足,但這應(yīng)該作為薄層色譜TLC分析的目標(biāo)(在柱色譜中,合適的溶劑應(yīng)該滿足Rf在0.2~0.3之間)。